血清淀粉樣蛋白A（SAA）的檢測方法

放射性免疫檢測法（RIA）

RIA有很高的檢測靈敏度，但由于標記物具有放射性危害，標記物穩定性差，廢棄物難以處理等缺點(diǎn)，已逐漸退出臨床檢驗領(lǐng)域。

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗（ELISA）

ELISA法采用辣根過(guò)氧化物酶(horseradish peroxidase，HRP)或堿性磷酸酶標記抗體，并催化底物產(chǎn)生顏色變化，具有操作簡(jiǎn)單，試劑穩定期長(cháng)的特點(diǎn)，但ELISA法的檢測靈敏度較低，線(xiàn)性范圍窄，目前主要應用于傳染性疾病篩查等對檢測靈敏度要求較低的項目。

實(shí)驗原理

用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗SAA抗體的微孔中依次加入SAA抗原標本或標準品、生物素化的抗SAA抗體、HRP標記的親和素，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后用底物TMD顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色。并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的SAA蛋白呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

乳膠免疫比濁法

乳膠免疫比濁法是利用抗原抗體反應原理測定血清中SAA蛋白的含量，此方法無(wú)法兼顧靈敏度和線(xiàn)性。

透射比濁法：免疫透射比濁法檢測SAA是沿光源的光路方向測量透射光強度和被檢測溶液微粒濃度關(guān)系。

散射比濁法：不同于透射比濁法，散射濁度法是檢測激光通過(guò)溶液時(shí)光線(xiàn)被粒子顆粒折射、偏轉的情況確定抗原抗體復合物顆粒大小和濃度。一些特定蛋白分析儀具有抗原過(guò)剩自動(dòng)檢測功能，當樣本中出現SAA過(guò)剩時(shí)，特定蛋白分析儀能夠實(shí)現自動(dòng)稀釋再檢測，防止鉤狀效應影響檢測結果。

膠體金斑點(diǎn)滲濾法

膠體金斑點(diǎn)滲濾法是應用微孔濾膜作載體，先將抗原/抗體點(diǎn)于膜上，封閉后加待檢樣本，洗滌后用膠體金標記的SAA抗體檢測相應的抗原/抗體。

免疫層析法

免疫層析法是采用膠體金、熒光微球、吖啶酯等作為標記物，以免疫層析方法，配合使用免疫分析儀，實(shí)現檢測人血清、血漿和全血樣本中SAA蛋白的含量。目前，市場(chǎng)上常見(jiàn)的免疫層析法有：膠體金定量免疫層析法，熒光定量免疫層析法，化學(xué)發(fā)光免疫分析法等。

參考文獻

[1] 黃建央, 沈敏敏, 劉東海. 血清淀粉樣蛋白A兩種檢測方法相關(guān)性的比對及相關(guān)疾病樣本檢測結果分析[J]. 檢驗醫學(xué), 2014, 29(5):574-575.
[2] 楊紅玲, 鄭磊, 周才, et al. 膠體金滲濾法檢測血清淀粉樣蛋白A方法評價(jià)及其在兒童感染性疾病診斷中的應用[J]. 中華檢驗醫學(xué)雜志, 2014, 37(11):836-841.

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